Стала известной благодаря участию в организации первой русской революции, в частности московского восстания в декабре 1905 года.
Родилась в семье купца 1-й гильдии Самуила Марковича Залкинда. Образование получила в Киевской женской гимназии и на медицинском факультете Лионского университета. В революционной деятельности с 17 лет.
С 1896 года — участник российского социал-демократического движения и член РСДРП. Подпольные псевдонимы — Демон, Осипов.
С 1901 агент «Искры» в Одессе и Екатеринославе. Делегат II съезда РСДРП (1903).
В 1903 кооптирована в ЦК партии.
В 1904 член Бюро комитетов большинства.
Делегат III съезда РСДРП (1905).
В 1905 секретарь Московского комитета РСДРП, партийный организатор Рогожско-Симоновского района, работала в военной организации партии. Неоднократно арестовывалась.
Розалия Самойловна Землячка работала агентом ЦК и приезжала на Урал в начале 1905 г. от Бюро комитетов большинства, писала 16 февраля Н. К. Крупской про состояние социал-демократических организаций: «Здесь я застала дела в ужасном виде. Комитет целиком провалился. Оказались группы по разным городам без комитета».
В 1909 секретарь Бакинской партийной организации, затем была в эмиграции.
В 1915—1916 член Московского бюро ЦК РСДРП.
С февраля 1917 секретарь 1-го легального Московского комитета РСДРП(б); делегат 7-й (Апрельской) Всероссийской конференции и VI съезда РСДРП(б), в октябре 1917 года руководила вооружённой борьбой рабочих Рогожско-Симоновского района.
После Октябрьской революции — на руководящей партийной и советской работе. Неоднократно избиралась членом ЦК и ЦКК ВКП(б).
В 1918 начальник политотделов 8-й и 13-й армий РККА.
В ноябре 1920 г. секретарь Крымского обкома РКП(б). Землячка вместе с Бела Куном и Юрием Пятаковым обвиняется в организации массовых расстрелов пленных белых офицеров армии П. Н. Врангеля. Однако, приказы Землячки об организации этих расстрелов отсутствуют, равно как и какие-либо фактические доказателства таких расстрелов, кроме слухов в белой эмиграции.
В 1922—1923 секретарь Замоскворецкого РК партии в Москве.
В 1924—1925 член Юго-Восточного бюро ЦК РКП(б), затем секретарь Мотовилихинского РК РКП(б) на Урале.
В 1926—1931 член коллегии наркомата РКИ.
В 1932—1933 член коллегии НКПС.
Делегат VIII, XI—XVIII съездов партии. С XIII съезда РКП(б) (1924) член ЦКК. На XVII съезде ВКП(6) (1934) избрана членом Комиссии советского контроля, работала заместителем председателя и председателем Комиссии советского контроля.
На XVIII съезде ВКП(6) (1939) избрана членом ЦК ВКП(б).
В 1939—1943 заместитель председателя Совнаркома СССР, с мая 1939 по сентябрь 1940 председатель Комиссии советского контроля при Совнаркоме СССР, затем заместитель председателя Комитета партийного контроля при ЦК ВКП(б).
Депутат Верховного Совета СССР 1—2-го созывов.
Награждена 2 орденами Ленина и орденом Красного Знамени.
Автор воспоминаний о В. И. Ленине (см. сборник «Воспоминания о В. И. Ленине», т. 2, 1969, с. 82—86).
Урна с прахом в в Кремлёвской стене на Красной площади в Москве.