Рольф Зингер родился 23 июня 1906 года в посёлке Шлирзе в Баварии.
Изучал химию в Мюнхенском университете, затем учился в Венском университете у Р. Веттштейна.
В 1933—1935 годах работал в Испании, в Барселоне (Universidad Aut?noma de Barcelona).
В 1935 году по приглашению Н. И. Вавилова приехал в СССР и работал в Отделе споровых растений Ботанического института АН СССР (Ленинград). Здесь он совершил несколько экспедиций, в том числе на Кавказ, Алтай, в Карелию, где занимался изучением агарикоидных и афиллофороидных грибов. Совместно с А. С. Бондарцевым была разработана новая система трутовых грибов, давшая впоследствии заметный толчок к прогрессу в систематике базидиомицетов в целом. В ленинградский период была начата работа над системой агариковых грибов, по которой защищена докторская диссертация.
В 1941 году Зингер вынужден был уехать из СССР и эмигрировать в США.
Умер в Чикаго 18 января 1994 года.
Рольф Зингер имеет около 400 публикаций на 9 языках.
Главный труд учёного — монография The Agaricales in modern taxonomy (Агарикальные грибы в современной таксономии), описывающая систему порядка Агариковые (Agaricales). Впервые издана в 1951 году, затем дорабатывалась и переиздавалась ещё 3 раза, последнее издание вышло в 1986 году.