4 января 2007 года Пелоси была избрана Председателем (спикером) Палаты представителей США, став первой женщиной на этом посту за историю США. Демократы тогда вновь восстановили большинство в нижней палате американского парламента после двенадцатилетнего пребывания в оппозиции. Она также стала самой высокопоставленной женщиной в американской истории, находясь на третьей строчке табели о рангах после Президента и Вице-президента США.
С 5 января 2011 г. — глава демократической фракции меньшинства.
Ненси Пелоси была одним из самых жестких критиков администрации Джорджа Буша-младшего. Впоследствии политик-демократ критиковала губернатора штата Калифорния Арнольда Шварцнеггера.