Барбара Колби родилась 2 июля 1939 года в Нью-Йорке.
Свою кинокарьеру Колби начала в 1960-х годах. Всего снялась примерно в 20 фильмах и телесериалах.
До момента смерти в июле 1975 года Барбара Колби была замужем за Бобом Левиттом, у них был сын Этель Мерман.
36-летняя Барбара Колби и актёр Джеймс Кирнан были застрелены 24 июля 1975 года, когда подходили к своей машине. Колби скончалась на месте, а вот Кирнан некоторое время оставался жив. Он рассказал, как всё происходило, но двух мужчин, которые в них стреляли не запомнил. Вскоре Кирнан скончался от полученных ран. Убийство осталось нераскрытым.