Анна Лайн родилась в кальвинистской семье Вильяма Хейджема (William Heigham). Впоследствии семья родители Анны приняли католицизм. В 1586 году Анна вышла замуж за Роджера Лайна, который вскоре из-за своей веры был вынужден покинуть Англию. В 1594 году, будучи в изгнании, Роджеж Лайн умер. Овдовев, Анна Лайн стала заниматься помощью находящимся в подполье католическим священнослужителям. Анна Лайн принимала участие в подпольной группе, организовавшей побег из Тауэра иезуита Джона Джерарда, из-за чего она была впоследствии вынуждена скрываться. Была арестована 2 февраля 1601 года и осуждена на смертную казнь. Приговор был исполнен 27 февраля 1601 года.
15 декабря 1929 года Анна Лайн была причислена к лику блаженных Римским Папой Пием XI и 25 октября 1970 года канонизирована Римским Папой Павлом VI в группе с другими английскими и уэльскими мучениками.
День памяти в Католической Церкви — 27 февраля.